Team:INSA-Lyon/Protocols/Extra

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====Cookies aux 3 chocolats====
====Cookies aux 3 chocolats====
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<ul>
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pour 20 cookies<br>
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<li>Inoculate about 5 mL sterile LB broth with the appropriate chassis</li>
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prép 15min<br>
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<li>Grow the cells on a shaker at 37°C overnight</li>
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cuisson 8 à 10min<br>
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<li>In the morning, inoculate about 100 mL sterile LB broth with the 5 mL-preculture (1:200).
+
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<li>Grow the cells on a shaker at 37°C until they reach an OD at 600 nm of 0.4 (about 108 bacteria/mL)
+
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<br><br>
+
75g de beurre à température ambiante<br>
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<span style="font-style : italic">It is possible to inoculate directly in 100 mL until they reach an OD at 0,4.</span>
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175g de sucre muscovado (ou roux)<br>
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<br><br>
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1 oeuf<br>
 +
150g de farine à levure incorporée (ou 150g farine + un sachet de levure)<br>
 +
2càs de cacao en poudre<br>
 +
100g de choco blanc haché ou en morceaux<br>
 +
100g de choco au lait haché ou en morceaux<br>
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<li>Transfer the culture in 40 mL falcon tube. Chill the cells on ice for 10 min.
+
mélangez le beurre et le sucre ds un saladier jusqu'à l'obtention d'un mélange mousseux.<br>
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    <br>From now on always work on ice</li>
+
Incorporer l'oeuf la farine et le cacao et mélanger jusqu'à ce que la pate soit onctueuse<br>
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<li>Spin the cells down at 5000 rpm for 10 min at 4°C</li>
+
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<li>Remove the supernatant using a sterile pipet</li>
+
-
<li>Resuspend each tube with 1/2 volume of sterile and cold CaCl2 100 mM (25 mL).
+
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    <br>Keep on ice for 30 min
+
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    <br>Spin at 5000 rpm for 5 min at 4°C</li>
+
-
<li>Resuspend each tube gently (by pipeting) with about 1/10 volume of CaCl2 100 mM, sterile cold glycerol 15% (2,5 mL CaCl2 100 mM + 1,5 glycerol 40%)</li>
+
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<li>Aliquot 0.2 ml (200 µl) of the solution using a sterile pipet into 1.5 ml eppendorf tubes which have been chilled on ice
+
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    <br>Use in the day or store the cells at -80 deg</li>
+
 +
Incorporer le chocolat<br>
 +
8 à 10min au four préchauffé à 180°C<br>
 +
laisser durcir<br>
</html>
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Revision as of 10:08, 27 July 2010


Protocols

  1. Competent cells
  2. Transformation
  3. DNA extraction
  4. Digestion
  5. Ligation
  6. Measure of temperature and shaking speed influence
  7. Measure of osmotic pressure influence
  8. Granules extraction and intein cleavage
  9. Biofilms quantification
  10. Extra

    Extra

    Cookies aux 3 chocolats

    pour 20 cookies
    prép 15min
    cuisson 8 à 10min
    75g de beurre à température ambiante
    175g de sucre muscovado (ou roux)
    1 oeuf
    150g de farine à levure incorporée (ou 150g farine + un sachet de levure)
    2càs de cacao en poudre
    100g de choco blanc haché ou en morceaux
    100g de choco au lait haché ou en morceaux
    mélangez le beurre et le sucre ds un saladier jusqu'à l'obtention d'un mélange mousseux.
    Incorporer l'oeuf la farine et le cacao et mélanger jusqu'à ce que la pate soit onctueuse
    Incorporer le chocolat
    8 à 10min au four préchauffé à 180°C
    laisser durcir

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