Team:HokkaidoU Japan/Notebook/September1

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Revision as of 05:54, 19 September 2010

Notebook

1-5A（RFP reporter）のPCR

Autoclaved DW : 33 uL
10x PCR buffer : 5 uL
2 mM dNTPs : 5 uL
25 mM MgSO4 : 3 uL
100 bp up primer : 1 uL
200 bp down primer : 1 uL
KOD plus Neo : 1 uL
Template (1-5A) : 1 uL
Total : 50 uL
  • パーツは1069bp，primerは300bpのため，余裕を持ってExtensionは90秒で行った
  • 得られたPCR solutionをMicrocon YM-10でろ過した

電気泳動

HokkaidoU Japan 20100901a.JPG

pUC119，pSB1C3，1-5Aの濃度を測定するため，電気泳動した（各1 uL使用）

  • 2: λ/Hind III（2 uL)
  • 3: pUC119 (3000bp): 10 ng/uL
  • 4: pSB1C3 (2000bp): 20 ng/uL
  • 5: 1-5A (1000bp): 80 ng/uL
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