Team:HokkaidoU Japan/Notebook/September4

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1-5A（RFP reporter）のPCR

Autoclaved DW : 33 uL
10x PCR buffer : 5 uL
2 mM dNTPs : 5 uL
25 mM MgSO4 : 3 uL
100 bp up primer : 1 uL
200 bp down primer : 1 uL
KOD plus Neo : 1 uL
Template (1-5A) : 1 uL
Total : 50 uL
  • パーツは1069bp，primerは300bpのため，余裕を持ってExtensionは90秒で行った

PCRで増やした1-3Aの電気泳動

HokkaidoU Japan 20100904a.jpg

λ/Hind IIIマーカー2 uLと，PCR product uL + 6x SB 1uLを泳動した
濃度は1 ug/uL以上と見積もられる

これを用いて，後日Digestionを行う
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