Team:HokkaidoU Japan/Notebook/September3
From 2010.igem.org
前日のトラフォメの結果
- pSB1C3を使ったトラフォメは全滅だった
- pUC119では計20個ほどのコロニーしか得られなかった
- 赤くなるはずが,赤くなっていなかったので,目的のInsertが入っていない可能性がある.
前日のトラフォメ菌のコロニーPCR
- プロトコル:コロニーPCRに従って,実験した
- 今回は20サンプルで行った
電気泳動
前日に使用したパーツの濃度測定
Ligationに使用したDNA solutionが予想通りの濃度だったのか確認した
- 1:
- 2: λ/Hind III, EcoR I
- 3:
- 4: RFP
- 5: pUC119
- 6: pSB1C3
1-3AのPCR
1-3AはpSB1C3に載ったRFP reporterで,トラフォメに成功している
ベクターとして配布されたpSB1C3が悪い可能性を見るため,このパーツのpSB1C3を増幅して使用する
1-3A | 1 |
DW | 33 |
10x Buffer | 5 |
2 M 4dNTPs | 5 |
25 mM MgSO4 | 3 |
Suffix-F | 1 |
Prefix-R | 1 |
KOD | 1 |
Total | 50 uL |
- extensionは120 sec
- YM-10でClean Upしたら43 uLになった