Team:KIT-Kyoto/Notebook-week11

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- 【時間】　9:00～18:00
  
  【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立
  
  【実験名】
  (1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
  (2)pGVBpttの電気泳動
  (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
  
  【実験目的】
  (1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
  (2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
  (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
  
  【実験内容】
  
  (1)プレカルチャー
  :DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養
  :DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養
  
  (2)pGVBpttの電気泳動
  
  :〈組成〉
  ::pGVBppt 5μL
  ::KpmI 1μL
  ::HindⅢ 1μL
  ::Buffer(M) 1μL
  ::H2O 11μL
  ::計 20μL
  
  :これを1h,37℃でインキュベート
  :　　　　　　　　↓
  :Loading Buffer　1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を
  :1% Agarose Gel のコームに流し込んだ
  :　　　　　　　　↓100V,30min泳動
  :　　　　　　　　↓EtBr(10mg/mL)で20min染色
  :泳動結果を写真で撮影した
  
  (3)psB3K3にSOC　0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした
  :　　　　　　　　　　　　　↓
  :　　37℃でインキュベート（Overnight）
  :
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