Team:HokkaidoU Japan/Notebook/August24

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Notebook

Check to see if digestion visualization Primers Work

Electrophoresis after restriction enzyme digestion‎
  • All 4 of PCR products were purified via Microcon YM-10
Lane DNA
1 TSUDA Marker I
3 RBS
4 GFP
5 double terminator
6 Promoter

Promoter band in lane 6 wasn't visible

  • This vector didn't have a primer annealing site for our new primers

Ligation Mixtureのチェック

Ligation Mixture「I」とLigation Mixture「M」について

  • PCRで増やしてゲル抽したpSB1C3 2 uLにLigation Mixture 4 uLをいれ，それぞれのTransformationした
  • LB 200 uLを加え，100 uLずつをChloramphenicol 34 ug/uLと 12 ug/uLの培地にまいた

いろいろ確認

HokkaidoU Japan 20100824b.jpg
Lane DNA
2 λ/Hind III
3 pSB1C3どうしのLigation
4 ラオリプライマーによる1-2NのPCRのろ過産物（上）
5 ラオリプライマーによる1-2NのPCRのろ過（下）
6 λ/Hind III
7 ゲル抽したpSB1C3

レーン３でバンドが見られなかった．

  • ダイマー，テトラマーなど，さまざまな断片ができ，薄くなってしまった？

レーン７は薄いがバンドが確認できた

  • ゲル抽に問題はない
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