Template:KIT-Kyoto-Augsut12
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+ | :(1) Agarose 0.2g | ||
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+ | :(2)プラスミドDNA(練習用)5μL(μg/μLで) | ||
+ | ::Marker 1μL(何のマーカー?) | ||
+ | ::Loading Buffer 1μL(組成) | ||
+ | ::を混ぜ、5μLずつgelにapply、 | ||
+ | ::一番左のレーンにはMarker 5μLをapplyした | ||
+ | :(3) 100V,30minで電気泳動した。 | ||
+ | :(4) EtBr(濃度を書く)にGelを20min浸けた。 | ||
+ | :(5) Band撮影、<s>Cut Check</s>をした。 | ||
== August 12 == | == August 12 == |
Revision as of 03:32, 25 September 2010
August 11
【時間】
- 9:00~18:00
【実験担当】
- 岩城,福山,竹内,臼井,足立
【実験目的】
- 電気泳動の練習をした
【実験内容】
- (1) Agarose 0.2g
- TEA 20μL
- を用いて1% Agarose Gel 作成をした。
- (2)プラスミドDNA(練習用)5μL(μg/μLで)
- Marker 1μL(何のマーカー?)
- Loading Buffer 1μL(組成)
- を混ぜ、5μLずつgelにapply、
- 一番左のレーンにはMarker 5μLをapplyした
- (3) 100V,30minで電気泳動した。
- (4) EtBr(濃度を書く)にGelを20min浸けた。
- (5) Band撮影、
Cut Checkをした。
August 12
【時間】
- 9:00~18:00
【実験担当】
- 岩城,福山,竹内,臼井,足立
【実験名】
- (1) pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
- (2) pGVBpttの電気泳動
- (3) psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
【実験目的】
- (1) pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
- (2) pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
- (3) psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
【実験内容】
- (1) pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
- DH5α-pSB6,DH5α-pSB1をそれぞれ液体LB培地(+amp)2mLで培養した
- (2) pGVBpttの電気泳動
<組成> pGVBppt 5μL KpmI 1μL HindⅢ 1μL Buffer M 1μL H2O 11μL 計 20μL これを37℃で1時間インキュベートした
↓Loading Buffer 1μLを加えたものとマーカー(1kbp radder)を
1% Agarose Gelのコームに流し込んだ
↓100Vで30分間泳動した
↓EtBr(10mg/mL)で20分間染色した
↓泳動結果を写真で撮影した
- (3) psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
- psB3K3にSOCを0.9mL加え、DH5αにトランスフォーメーションした
- ↓37℃でインキュベートした(Overnight)