Team:HokkaidoU Japan/Notebook/September24

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(→Arac+RBS+pSB1A3保有株のminiprep)
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#4C,15000rpm,1minで遠心した。
#4C,15000rpm,1minで遠心した。
#上澄みを捨て、4Cで保存しておいたBuffer P1をそれぞれ125 uLずつ入れ、Voltexで撹拌した。
#上澄みを捨て、4Cで保存しておいたBuffer P1をそれぞれ125 uLずつ入れ、Voltexで撹拌した。
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#溶液は白濁し、沈殿がなくなったことを確認した。
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#Buffer N3を175 uLずつ入れ、すぐに転倒混和した。
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#Buffer N3を175 uLずつ入れ、すぐに転倒混和した。溶液中に白い塊を確認した。
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#4C,13000rpm,10min遠心した。
#4C,13000rpm,10min遠心した。
#上澄みをデカントでカラムに移し、4C,13000rpm,1minで遠心した。
#上澄みをデカントでカラムに移し、4C,13000rpm,1minで遠心した。
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#下澄みを捨て、さらに1min遠心した。
#下澄みを捨て、さらに1min遠心した。
#新しい1.5 mLチューブにカラムを移し、TEを50 uL入れ1min放置した後、1min遠心した。
#新しい1.5 mLチューブにカラムを移し、TEを50 uL入れ1min放置した後、1min遠心した。
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== miniprep後のサンプル泳動 ==
== miniprep後のサンプル泳動 ==

Revision as of 03:11, 24 September 2010

Notebook
  • Arac+RBS+pSB1A3保有株のminiprep
  • miniprep後のサンプル泳動

Arac+RBS+pSB1A3保有株のminiprep

  1. 昨日懸濁しておいた菌を1 mLずつ1.5 mLチューブ2本に分注した。
  2. 4C,15000rpm,1minで遠心した。
  3. 上澄みを捨て、4Cで保存しておいたBuffer P1をそれぞれ125 uLずつ入れ、Voltexで撹拌した。
  4. Buffer N3を175 uLずつ入れ、すぐに転倒混和した。
  5. 4C,13000rpm,10min遠心した。
  6. 上澄みをデカントでカラムに移し、4C,13000rpm,1minで遠心した。
  7. 下澄み液を捨て、500 uLのBuffer PBを添加して、4C,13000rpm,1minで遠心した。
  8. 下澄みを捨て、さらに1min遠心した。
  9. 新しい1.5 mLチューブにカラムを移し、TEを50 uL入れ1min放置した後、1min遠心した。
== miniprep後のサンプル泳動 ==
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