Team:KIT-Kyoto/Notebook-week11

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Revision as of 13:56, 6 September 2010

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【時間】　9:00～18:00

【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立

【実験名】
(1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
(2)pGVBpttの電気泳動
(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション

【実験目的】
(1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
(2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション

【実験内容】

(1)プレカルチャー
:DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養
:DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養

(2)pGVBpttの電気泳動

:〈組成〉
::pGVBppt 5μL
::KpmI 1μL
::HindⅢ 1μL
::Buffer(M) 1μL
::H2O 11μL
::計 20μL

:これを1h,37℃でインキュベート
:　　　　　　　　↓
:Loading Buffer　1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を
:1% Agarose Gel のコームに流し込んだ
:　　　　　　　　↓100V,30min泳動
:　　　　　　　　↓EtBr(10mg/mL)で20min染色
:泳動結果を写真で撮影した

(3)psB3K3にSOC　0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした
:　　　　　　　　　　　　　↓
:　　37℃でインキュベート（Overnight）

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