Team:KIT-Kyoto/Notebook-week11

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     <ul class="fxmn">  
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       <li><a href="11">{{Template:KIT-Kyoto-Augsut11}}</a></li>  
+
       <li><a href="11">【時間】 9:00~18:00
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【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立
 +
【実験名】
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(1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
 +
(2)pGVBpttの電気泳動
 +
(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
 +
【実験目的】
 +
(1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
 +
(2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
 +
(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
 +
【実験内容】
 +
(1)プレカルチャー
 +
DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養
 +
DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養
 +
(2)pGVBpttの電気泳動
 +
〈組成〉
 +
pGVBppt 5μL
 +
KpmI 1μL
 +
HindⅢ 1μL
 +
Buffer(M) 1μL
 +
H2O 11μL
 +
計 20μL
 +
これを1h,37℃でインキュベート
 +
        ↓
 +
Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を
 +
1% Agarose Gel のコームに流し込んだ
 +
        ↓100V,30min泳動
 +
        ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色
 +
泳動結果を写真で撮影した
 +
 
 +
(3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした
 +
             ↓
 +
  37℃でインキュベート(Overnight)</a></li>  
     </ul>  
     </ul>  
   </li>  
   </li>  

Revision as of 13:28, 6 September 2010