Team:KIT-Kyoto/Notebook-week11
From 2010.igem.org
(Difference between revisions)
Line 51: | Line 51: | ||
<li><a href="1">category1</a> | <li><a href="1">category1</a> | ||
<ul class="fxmn"> | <ul class="fxmn"> | ||
- | <li><a href="11"> | + | <li><a href="11">【時間】 9:00~18:00 |
+ | 【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立 | ||
+ | 【実験名】 | ||
+ | (1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー | ||
+ | (2)pGVBpttの電気泳動 | ||
+ | (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション | ||
+ | 【実験目的】 | ||
+ | (1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー | ||
+ | (2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため | ||
+ | (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション | ||
+ | 【実験内容】 | ||
+ | (1)プレカルチャー | ||
+ | DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養 | ||
+ | DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養 | ||
+ | (2)pGVBpttの電気泳動 | ||
+ | 〈組成〉 | ||
+ | pGVBppt 5μL | ||
+ | KpmI 1μL | ||
+ | HindⅢ 1μL | ||
+ | Buffer(M) 1μL | ||
+ | H2O 11μL | ||
+ | 計 20μL | ||
+ | これを1h,37℃でインキュベート | ||
+ | ↓ | ||
+ | Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を | ||
+ | 1% Agarose Gel のコームに流し込んだ | ||
+ | ↓100V,30min泳動 | ||
+ | ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色 | ||
+ | 泳動結果を写真で撮影した | ||
+ | |||
+ | (3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした | ||
+ | ↓ | ||
+ | 37℃でインキュベート(Overnight)</a></li> | ||
</ul> | </ul> | ||
</li> | </li> |
Revision as of 13:28, 6 September 2010