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Revision as of 13:32, 6 September 2010

• category1
  • 【時間】　9:00～18:00
    
    【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立
    
    【実験名】
    (1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
    (2)pGVBpttの電気泳動
    (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
    
    【実験目的】
    (1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
    (2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
    (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
    
    【実験内容】
    
    (1)プレカルチャー
    :DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養
    :DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養
    
    (2)pGVBpttの電気泳動
    
    :〈組成〉
    ::pGVBppt 5μL
    ::KpmI 1μL
    ::HindⅢ 1μL
    ::Buffer(M) 1μL
    ::H2O 11μL
    ::計 20μL
    
    :これを1h,37℃でインキュベート
    :　　　　　　　　↓
    :Loading Buffer　1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を
    :1% Agarose Gel のコームに流し込んだ
    :　　　　　　　　↓100V,30min泳動
    :　　　　　　　　↓EtBr(10mg/mL)で20min染色
    :泳動結果を写真で撮影した
    
    
    (3)psB3K3にSOC　0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした
    :　　　　　　　　　　　　　↓
    :　　37℃でインキュベート（Overnight）
    :
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