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Team:KIT-Kyoto/Notebook-week11
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| - | 【時間】 9:00～18:00 | + | 【時間】 9:00～18:00<BR> |
| - | + | <BR> | |
| - | 【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立 | + | 【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立<BR> |
| - | + | <BR> | |
| - | 【実験名】 | + | 【実験名】<BR> |
| - | + | (1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー<BR> | |
| - | + | (2)pGVBpttの電気泳動<BR> | |
| - | + | (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション<BR> | |
| - | + | <BR> | |
| - | 【実験目的】 | + | 【実験目的】<BR> |
| - | + | (1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー<BR> | |
| - | + | (2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため<BR> | |
| - | + | (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション<BR> | |
| - | + | <BR> | |
| - | 【実験内容】 | + | 【実験内容】<BR> |
| - | + | <BR> | |
| - | (1)プレカルチャー | + | (1)プレカルチャー<BR> |
| - | :DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養 | + | :DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養<BR> |
| - | :DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養 | + | :DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養<BR> |
| - | + | <BR> | |
| - | (2)pGVBpttの電気泳動 | + | (2)pGVBpttの電気泳動<BR> |
| - | + | <BR> | |
| - | :〈組成〉 | + | :〈組成〉<BR> |
| - | ::pGVBppt 5μL | + | ::pGVBppt 5μL<BR> |
| - | ::KpmI 1μL | + | ::KpmI 1μL <BR> |
| - | ::HindⅢ 1μL | + | ::HindⅢ 1μL <BR> |
| - | ::Buffer(M) 1μL | + | ::Buffer(M) 1μL <BR> |
| - | ::H2O 11μL | + | ::H2O 11μL <BR> |
| - | ::計 20μL | + | ::計 20μL <BR> |
| - | + | <BR> | |
| - | :これを1h,37℃でインキュベート | + | :これを1h,37℃でインキュベート<BR> |
| - | : ↓ | + | : ↓<BR> |
| - | :Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を | + | :Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を<BR> |
| - | :1% Agarose Gel のコームに流し込んだ | + | :1% Agarose Gel のコームに流し込んだ<BR> |
| - | : ↓100V,30min泳動 | + | : ↓100V,30min泳動<BR> |
| - | : ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色 | + | : ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色<BR> |
| - | :泳動結果を写真で撮影した | + | :泳動結果を写真で撮影した<BR> |
| - | + | <BR> | |
| - | + | <BR> | |
| - | (3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした | + | (3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした<BR> |
| - | : ↓ | + | : ↓<BR> |
| - | : 37℃でインキュベート（Overnight） | + | : 37℃でインキュベート（Overnight）<BR> |
: | : | ||
Revision as of 13:30, 6 September 2010
