Team:HokkaidoU Japan/Notebook/October3

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* コントロールの16番以外，それらしいバンドがある
* コントロールの16番以外，それらしいバンドがある
* 2 ug/uLくらいのDNA量と推定
* 2 ug/uLくらいのDNA量と推定
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<div style="clear:both;"></div>
==Insertの確認==
==Insertの確認==
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|-
|3
|3
-
|rowspan="3"|No.8
+
|rowspan="3"|plasmid No.8
|Not I
|Not I
|-
|-
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|-
|6
|6
-
|rowspan="3"|No.10
+
|rowspan="3"|plasmid No.10
|Not I
|Not I
|-
|-
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|9
|9
-
|rowspan="3"|No.11
+
|rowspan="3"|plasmid No.11
|Not I
|Not I
|-
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|12
|12
-
|rowspan="3"|No.14
+
|rowspan="3"|plasmid No.14
|Not I
|Not I
|-
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|15
|15
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|rowspan="3"|No.16
+
|rowspan="3"|plasmid No.16
|Not I
|Not I
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* 制限酵素の切れは悪いが，およそ1800 bpの位置にバンドが見られる
 +
->シークエンスをとって，結果の良さそうなものを翌日，2 piece ligation

Latest revision as of 06:42, 4 October 2010

Notebook

Miniprep

HokkaidoU Japan 20101003a.JPG

コロニー8, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16からミニプレキットでプラスミドを精製した
->うち1 uLを泳動して確認

  • Insertはおよそ1800 bp, Vectorはおよそ2500 b
  • コントロールの16番以外，それらしいバンドがある
  • 2 ug/uLくらいのDNA量と推定

Insertの確認

HokkaidoU Japan 20101003b.JPG

Miniprepで得たプラスミドをNot Iで処理すれば，約1800 bpのInsertが得られるはずである

well DNA RE
1 λ/Hind III (2 uL) -
2 pSB1T3 (1 uL) -
3 plasmid No.8 Not I
4 EcoR I
5 -
6 plasmid No.10 Not I
7 EcoR I
8 -
9 plasmid No.11 Not I
10 EcoR I
11 -
12 plasmid No.14 Not I
13 EcoR I
14 -
15 plasmid No.16 Not I
16 EcoR I
17 -
  • 制限酵素の切れは悪いが，およそ1800 bpの位置にバンドが見られる
->シークエンスをとって，結果の良さそうなものを翌日，2 piece ligation
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