Team:HokkaidoU Japan/Notebook/September24

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*Arac+RBS+pSB1A3保有株のminiprep
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*miniprep後のサンプル泳動
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== Arac+RBS+pSB1A3保有株のminiprep ==
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#昨日懸濁しておいた菌を1 mLずつ1.5 mLチューブ2本に分注した。
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#4C,15000rpm,1minで遠心した。
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#上澄みを捨て、4Cで保存しておいたBuffer P1をそれぞれ125 uLずつ入れ、Voltexで撹拌した。
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#溶液は白濁し、沈殿がなくなったことを確認した。
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#Buffer N3を175 uLずつ入れ、すぐに転倒混和した。溶液中に白い塊を確認した。
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#4C,13000rpm,10min遠心した。
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#上澄みをデカントでカラムに移し、4C,13000rpm,1minで遠心した。
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#下澄み液を捨て、500 uLのBuffer PBを添加して、4C,13000rpm,1minで遠心した。
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#下澄みを捨て、さらに1min遠心した。
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#新しい1.5 mLチューブにカラムを移し、TEを50 uL入れ1min放置した後、1min遠心した。
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== miniprep後のサンプル泳動 ==

Revision as of 03:10, 24 September 2010

Notebook
  • Arac+RBS+pSB1A3保有株のminiprep
  • miniprep後のサンプル泳動

Arac+RBS+pSB1A3保有株のminiprep

  1. 昨日懸濁しておいた菌を1 mLずつ1.5 mLチューブ2本に分注した。
  2. 4C,15000rpm,1minで遠心した。
  3. 上澄みを捨て、4Cで保存しておいたBuffer P1をそれぞれ125 uLずつ入れ、Voltexで撹拌した。
  4. 溶液は白濁し、沈殿がなくなったことを確認した。
  5. Buffer N3を175 uLずつ入れ、すぐに転倒混和した。溶液中に白い塊を確認した。
  6. 4C,13000rpm,10min遠心した。
  7. 上澄みをデカントでカラムに移し、4C,13000rpm,1minで遠心した。
  8. 下澄み液を捨て、500 uLのBuffer PBを添加して、4C,13000rpm,1minで遠心した。
  9. 下澄みを捨て、さらに1min遠心した。
  10. 新しい1.5 mLチューブにカラムを移し、TEを50 uL入れ1min放置した後、1min遠心した。


== miniprep後のサンプル泳動 ==
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