Template:KIT-Kyoto-Augsut12

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(Augsut 12)
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【実験名】
【実験名】
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(1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
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:(1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
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(2)pGVBpttの電気泳動
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:(2)pGVBpttの電気泳動
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(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
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:(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
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【実験目的】
【実験目的】
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(1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
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:(1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
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(2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
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:(2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
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(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
+
:(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
   
   
【実験内容】
【実験内容】
(1)プレカルチャー
(1)プレカルチャー
-
DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養
+
:DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養
-
DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養
+
:DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養
(2)pGVBpttの電気泳動
(2)pGVBpttの電気泳動
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〈組成〉
+
:〈組成〉
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pGVBppt 5μL
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::pGVBppt 5μL
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KpmI 1μL  
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::KpmI 1μL  
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HindⅢ 1μL  
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::HindⅢ 1μL  
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Buffer(M) 1μL  
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::Buffer(M) 1μL  
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H2O 11μL  
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::H2O 11μL  
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計  20μL   
+
::計  20μL   
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これを1h,37℃でインキュベート
+
:これを1h,37℃でインキュベート
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        ↓
+
:        ↓
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Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を
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:Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を
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1% Agarose Gel のコームに流し込んだ
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:1% Agarose Gel のコームに流し込んだ
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        ↓100V,30min泳動
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:        ↓100V,30min泳動
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        ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色
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:        ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色
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泳動結果を写真で撮影した
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:泳動結果を写真で撮影した
(3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした
(3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした
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             ↓
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:             ↓
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  37℃でインキュベート(Overnight)
+
:  37℃でインキュベート(Overnight)
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Revision as of 13:02, 6 September 2010

Augsut 12

【時間】 9:00~18:00

【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立

【実験名】

(1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
(2)pGVBpttの電気泳動
(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション

【実験目的】

(1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
(2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション

【実験内容】

(1)プレカルチャー

DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養
DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養

(2)pGVBpttの電気泳動

〈組成〉
pGVBppt 5μL
KpmI 1μL
HindⅢ 1μL
Buffer(M) 1μL
H2O 11μL
計 20μL
これを1h,37℃でインキュベート
        ↓
Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を
1% Agarose Gel のコームに流し込んだ
        ↓100V,30min泳動
        ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色
泳動結果を写真で撮影した


(3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした

             ↓
  37℃でインキュベート(Overnight)