Template:KIT-Kyoto-Augsut12
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- | (2)pGVBpttの電気泳動 | + | :(2)pGVBpttの電気泳動 |
- | (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション | + | :(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション |
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【実験目的】 | 【実験目的】 | ||
- | (1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー | + | :(1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー |
- | (2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため | + | :(2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため |
- | (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション | + | :(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション |
【実験内容】 | 【実験内容】 | ||
(1)プレカルチャー | (1)プレカルチャー | ||
- | DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養 | + | :DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養 |
- | DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養 | + | :DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養 |
(2)pGVBpttの電気泳動 | (2)pGVBpttの電気泳動 | ||
- | 〈組成〉 | + | :〈組成〉 |
- | pGVBppt 5μL | + | ::pGVBppt 5μL |
- | KpmI 1μL | + | ::KpmI 1μL |
- | HindⅢ 1μL | + | ::HindⅢ 1μL |
- | Buffer(M) 1μL | + | ::Buffer(M) 1μL |
- | H2O 11μL | + | ::H2O 11μL |
- | 計 20μL | + | ::計 20μL |
- | これを1h,37℃でインキュベート | + | :これを1h,37℃でインキュベート |
- | ↓ | + | : ↓ |
- | Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を | + | :Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を |
- | 1% Agarose Gel のコームに流し込んだ | + | :1% Agarose Gel のコームに流し込んだ |
- | ↓100V,30min泳動 | + | : ↓100V,30min泳動 |
- | ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色 | + | : ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色 |
- | 泳動結果を写真で撮影した | + | :泳動結果を写真で撮影した |
(3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした | (3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした | ||
- | ↓ | + | : ↓ |
- | 37℃でインキュベート(Overnight) | + | : 37℃でインキュベート(Overnight) |
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Revision as of 13:02, 6 September 2010
Augsut 12
【時間】 9:00~18:00
【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立
【実験名】
- (1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
- (2)pGVBpttの電気泳動
- (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
【実験目的】
- (1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
- (2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
- (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
【実験内容】
(1)プレカルチャー
- DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養
- DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養
(2)pGVBpttの電気泳動
- 〈組成〉
- pGVBppt 5μL
- KpmI 1μL
- HindⅢ 1μL
- Buffer(M) 1μL
- H2O 11μL
- 計 20μL
- これを1h,37℃でインキュベート
- ↓
- Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を
- 1% Agarose Gel のコームに流し込んだ
- ↓100V,30min泳動
- ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色
- 泳動結果を写真で撮影した
(3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした
- ↓
- 37℃でインキュベート(Overnight)