Template:KIT-Kyoto-Augsut12
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Revision as of 13:00, 6 September 2010
Augsut 12
【時間】 9:00~18:00
【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立
【実験名】 (1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー (2)pGVBpttの電気泳動 (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
【実験目的】 (1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー (2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
【実験内容】
(1)プレカルチャー DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養 DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養
(2)pGVBpttの電気泳動
〈組成〉 pGVBppt 5μL KpmI 1μL HindⅢ 1μL Buffer(M) 1μL H2O 11μL 計 20μL
これを1h,37℃でインキュベート ↓ Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を 1% Agarose Gel のコームに流し込んだ ↓100V,30min泳動 ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色 泳動結果を写真で撮影した
(3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした
↓
37℃でインキュベート(Overnight)