Template:KIT-Kyoto-Augsut12

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【時間】 9:00~18:00
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【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立
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【実験名】
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(1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
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(2)pGVBpttの電気泳動
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(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
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【実験目的】
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(1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
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(2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
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(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
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【実験内容】
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(1)プレカルチャー
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DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養
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DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養
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(2)pGVBpttの電気泳動
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〈組成〉
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pGVBppt 5μL
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KpmI 1μL
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HindⅢ 1μL
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Buffer(M) 1μL
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H2O 11μL
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計  20μL 
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これを1h,37℃でインキュベート
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Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を
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1% Agarose Gel のコームに流し込んだ
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        ↓100V,30min泳動
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        ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色
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泳動結果を写真で撮影した
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(3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした
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  37℃でインキュベート(Overnight)

Revision as of 12:59, 6 September 2010

Augsut 12

【時間】 9:00~18:00

【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立

【実験名】 (1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー (2)pGVBpttの電気泳動 (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション

【実験目的】 (1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー (2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション

【実験内容】

(1)プレカルチャー DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養 DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養

(2)pGVBpttの電気泳動

〈組成〉 pGVBppt 5μL KpmI 1μL HindⅢ 1μL Buffer(M) 1μL H2O 11μL

計   	20μL  

これを1h,37℃でインキュベート         ↓

Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を

1% Agarose Gel のコームに流し込んだ         ↓100V,30min泳動         ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色 泳動結果を写真で撮影した


(3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした              ↓   37℃でインキュベート(Overnight)