Template:KIT-Kyoto/Parts1
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- | + | 私たちは2009年の東京工業大学のグループによって設計されたBioBrick Part(pSB6A1)に新情報を加えました。 このBioBrick Partは、<I>E.coli</I>でGFPを発現するように設計された低コピープラスミドであるpSB6を骨格としています。一般に、低コピープラスミドは、pSB1のような高コピープラスミドと比較してタンパク質発現の効率が高い。しかしながら、このプラスミドに関してGFPタンパク質発現の効率に関する定量的なデータはiGEMのどんなサイトでも説明されていませんでした。よって、pSB6A1とpSB1A2のプラスミドをもつ<I>E.coli</I>で生産されるGFPタンパク質の蛍光強度を測定しました。結果、pSB1A2をもつ<I>E.coli</I>と比較してpSB6A1もつ<I>E.coli</I>ではGFPの発現レベルが高いことが明らかにわかりました。このようにして、我々はH<sub>2</sub>O<sub>2</sub>に応答する様々なプロモーターの活性を測定するのにpSB6のベクターを使用することに決めました。 私たちは、2009年にこれを開発した東京工業大学のグループに感謝します。 | |
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Latest revision as of 14:03, 26 October 2010
私たちはこれらのパーツを利用して、新たなbiobrickのパーツ作りに取り組みました
1.私たちはこれらのパーツを2010 iGEM kitから入手しました
Name | Part type | Resistance | Insert | Vector | Contents |
---|---|---|---|---|---|
<partinfo>pSB3k3</partinfo>(<partinfo>BBa_J04450</partinfo>) | Plasmid backbone | Kanamycin | 738bp | 2750bp | promoter(LacI) +RBS+mRFP+T+T |
<partinfo>pSB6A1</partinfo>(<partinfo>BBa_J04450</partinfo>) | Plasmid backbone | Ampicillin | 738bp | 4032bp | promoter(LacI) +RBS+mRFP+T+T |
<partinfo>pSB1C3</partinfo>(<partinfo>BBa_J04450</partinfo>) | Plasmid backbone | Chloramphenicol | 1069bp | 2072bp | promoter(LacI) +RBS+mRFP+T+T |
<partinfo>pSB1A2</partinfo>(<partinfo>BBa_I3522</partinfo>) | Composite | Ampicillin | 937bp | 2079bp | promoter(TetR)+RBS+GFP+T+T |
<partinfo>pSB1A2</partinfo>(<partinfo>BBa_R0040</partinfo>) | Regulatory | Ampicillin | 54bp | 2079bp | promoter(TetR) |
<partinfo>pSB1A2</partinfo>(<partinfo>BBa_I732019</partinfo>) | Regulatory | Ampicillin | 3230bp | 2079bp | RBS+LacZ+T+T |
<partinfo>pSB1AK3</partinfo>(<partinfo>BBa_I732950</partinfo>) | Protein domain | Kanamycin | 3230bp | 2079bp | RBS+LacZ+T+T |
<partinfo>pSB4A5</partinfo>(<partinfo>BBa_K193602</partinfo>) | Composite | Ampicillin | 1896bp | 3395bp | |
<partinfo>pSB1A2</partinfo>(<partinfo>BBa_E0240</partinfo>) | Protein domain | Ampicillin | 883bp | 2079bp | RBS+GFP+T+T |
<partinfo>pSB1A2</partinfo>(<partinfo>BBa_I13507</partinfo>) | Protein domain | Ampicillin | 937bp | 2079bp | RBS+RFP+T+T |
<partinfo>pSB1A2</partinfo>(<partinfo>BBa_E0420</partinfo>) | Protein domain | Ampicillin | 878bp | 2079bp | RBS+CFP+T+T |
<partinfo>pSB1A2</partinfo>(<partinfo>BBa_E0430</partinfo>) | Protein domain | Ampicillin | 878bp | 2079bp | RBS+YFP+T+T |
<partinfo>pSB1A2</partinfo>(<partinfo>BBa_I13600</partinfo>) | Composite | Ampicillin | 940bp | 2079bp | promoter(TetR)+RBS+CFP+T+T |
<partinfo>pSB1A2</partinfo>(<partinfo>BBa_J22005</partinfo>) | Composite | Ampicillin | 2079bp | 2623bp | promoter(TetR)+RBS+YFP+T+T |
2.このパーツはiGEM本部から直接入手しました
私たちは2009年の東京工業大学のグループによって設計されたBioBrick Part(pSB6A1)に新情報を加えました。 このBioBrick Partは、E.coliでGFPを発現するように設計された低コピープラスミドであるpSB6を骨格としています。一般に、低コピープラスミドは、pSB1のような高コピープラスミドと比較してタンパク質発現の効率が高い。しかしながら、このプラスミドに関してGFPタンパク質発現の効率に関する定量的なデータはiGEMのどんなサイトでも説明されていませんでした。よって、pSB6A1とpSB1A2のプラスミドをもつE.coliで生産されるGFPタンパク質の蛍光強度を測定しました。結果、pSB1A2をもつE.coliと比較してpSB6A1もつE.coliではGFPの発現レベルが高いことが明らかにわかりました。このようにして、我々はH2O2に応答する様々なプロモーターの活性を測定するのにpSB6のベクターを使用することに決めました。 私たちは、2009年にこれを開発した東京工業大学のグループに感謝します。
Name | Part Type | Resistance | Insert | Vector | |
---|---|---|---|---|---|
<partinfo>pSB6A1</partinfo>(<partinfo>BBa_K121013</partinfo>) | Protein domain | Ampicillin | 883bp | 4022bp | RBS+GFP+T+T |