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From 2010.igem.org

Augsut 12

【時間】　9:00～18:00

【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立

【実験名】 (1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー (2)pGVBpttの電気泳動 (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション

【実験目的】 (1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー (2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため (3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション

【実験内容】

(1)プレカルチャー DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養 DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養

(2)pGVBpttの電気泳動

〈組成〉 pGVBppt 5μL KpmI 1μL HindⅢ 1μL Buffer(M) 1μL H2O 11μL

計   	20μL  

これを1h,37℃でインキュベート 　　　　　　　　↓

Loading Buffer　1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を

1% Agarose Gel のコームに流し込んだ 　　　　　　　　↓100V,30min泳動 　　　　　　　　↓EtBr(10mg/mL)で20min染色 泳動結果を写真で撮影した

(3)psB3K3にSOC　0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした 　　　　　　　　　　　　　↓ 　　37℃でインキュベート（Overnight）