Template:KIT-Kyoto-Augsut12

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【実験担当】岩城,福山,竹内,臼井,足立
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:岩城,福山,竹内,臼井,足立
【実験名】
【実験名】
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:(1)pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
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:(1) pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
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:(2)pGVBpttの電気泳動
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:(2) pGVBpttの電気泳動
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:(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
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:(3) psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
【実験目的】
【実験目的】
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:(1)pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
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:(1) pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
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:(2)pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
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:(2) pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
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:(3)psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
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:(3) psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
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【実験内容】
【実験内容】
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:(1) pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
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:: DH5α-pSB6,DH5α-pSB1をそれぞれ液体LB培地(+amp)2mLで培養した
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(1)プレカルチャー
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:(2) pGVBpttの電気泳動
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:DH5α-pSB6を液体LB培地(+amp)2mLで培養
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:<TABLE BORDER="0"><TR>
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:DH5α-pSB1 を液体LB培地(+amp)2mLで培養
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:<TD></TD><TD></TD>
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:<TD><TABLE BORDER="0"><TR><TD>これを37℃で1時間インキュベートした<BR>↓Loading Buffer 1μLを加えたものとマーカー(1kbp radder)を<BR> 1% Agarose Gelのコームに流し込んだ<BR>↓100Vで30分間泳動した<BR>↓EtBr(10mg/mL)で20分間染色した<BR>↓泳動結果を写真で撮影した</TD></TR></TABLE>
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(2)pGVBpttの電気泳動
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:</TD>
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:<TD>
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:〈組成〉
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:<TABLE BORDER="1"><TR>
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::pGVBppt 5μL
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:<TD><組成></TD></TR>
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::KpmI 1μL  
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:<TR>
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::HindⅢ 1μL  
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:<TD>pGVBppt</TD><TD>5μL</TD></TR>
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::Buffer(M) 1μL  
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::H2O 11μL  
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:<TD>KpmI</TD><TD>1μL</TD></TR>
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::計   20μL
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:<TR>
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:<TD>HindⅢ</TD><TD>1μL</TD></TR>
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:これを1h,37℃でインキュベート
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:<TR>
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:        ↓
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:<TD>Buffer M</TD><TD>1μL</TD></TR>
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:Loading Buffer 1μLを加えたものと、マーカー(1kbp radder)を
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:1% Agarose Gel のコームに流し込んだ
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:<TD>H2O</TD><TD>11μL</TD></TR>
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:        ↓100V,30min泳動
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:<TR>
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:        ↓EtBr(10mg/mL)で20min染色
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:<TD></TD><TD>20μL</TD></TR>
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:泳動結果を写真で撮影した
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(3)psB3K3にSOC 0.9mLを加えDH5αにトランスフォーメーションした
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:(3) psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
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:             ↓
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:: psB3K3にSOCを0.9mL加え、DH5αにトランスフォーメーションした
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:  37℃でインキュベート(Overnight)
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:: ↓37℃でインキュベートした(Overnight)
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Revision as of 04:40, 15 September 2010

August 12

【時間】

9:00~18:00

【実験担当】

岩城,福山,竹内,臼井,足立

【実験名】

(1) pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
(2) pGVBpttの電気泳動
(3) psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション

【実験目的】

(1) pSB6A1(K121013)及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
(2) pGVBpttが正しく制限酵素処理されているかどうかを確認するため
(3) psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション

【実験内容】

(1) pSB6及びpsB1(非パーツ)のプレカルチャー
 DH5α-pSB6,DH5α-pSB1をそれぞれ液体LB培地(+amp)2mLで培養した
(2) pGVBpttの電気泳動
これを37℃で1時間インキュベートした
↓Loading Buffer 1μLを加えたものとマーカー(1kbp radder)を
 1% Agarose Gelのコームに流し込んだ
↓100Vで30分間泳動した
↓EtBr(10mg/mL)で20分間染色した
↓泳動結果を写真で撮影した
<組成>
pGVBppt5μL
KpmI1μL
HindⅢ1μL
Buffer M1μL
H2O11μL
20μL
(3) psB3K3(J04450)のトランスフォーメーション
 psB3K3にSOCを0.9mL加え、DH5αにトランスフォーメーションした
 ↓37℃でインキュベートした(Overnight)