Team:HokkaidoU Japan/Notebook/September8

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PS-R, EX-FによるコロＰがうまくいくのかを確かめるため＆目的のinsertionを確かめるためのコロP
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* 6日のトラフォメ H buffer×２，M buffer×２
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* 1-3A
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* 6日にやったトラフォメをもう一度
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* pUC119
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=pSB1C3の確認=
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1-3A（RFP reporter）由来のpSB1C3を使っているため，RFP発現がこれに由来している可能性が無くない
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* H buffer処理 2 uL ＋ Mighty Mix 2 uL ＋ T4 ligase 0.5 uL　→　Ligation　→　Transformation
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* M buffer処理 2 uL ＋ Mighty Mix 2 uL ＋ T4 ligase 0.5 uL　→　Ligation　→　Transformation
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* H buffer処理 2 uL　→　Transformation
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* H buffer処理 2 uL　→　Transformation
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=GFPのPCR=
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* GFP reporter BBa_I13522 pSB1A2 2-8A 937bp
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* GFP protein BBa_E0840 pSB1A2 1-12O 878bp
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9月1日と同じメニューでPCRを行った

Revision as of 12:56, 18 September 2010

コロニーPCR

PS-R, EX-FによるコロＰがうまくいくのかを確かめるため＆目的のinsertionを確かめるためのコロP

  • 6日のトラフォメ H buffer×２，M buffer×２
  • 1-3A
  • 6日にやったトラフォメをもう一度
  • pUC119

pSB1C3の確認

1-3A（RFP reporter）由来のpSB1C3を使っているため，RFP発現がこれに由来している可能性が無くない

  • H buffer処理 2 uL ＋ Mighty Mix 2 uL ＋ T4 ligase 0.5 uL　→　Ligation　→　Transformation
  • M buffer処理 2 uL ＋ Mighty Mix 2 uL ＋ T4 ligase 0.5 uL　→　Ligation　→　Transformation
  • H buffer処理 2 uL　→　Transformation
  • H buffer処理 2 uL　→　Transformation

GFPのPCR

  • GFP reporter BBa_I13522 pSB1A2 2-8A 937bp
  • GFP protein BBa_E0840 pSB1A2 1-12O 878bp
9月1日と同じメニューでPCRを行った
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