Team:HokkaidoU Japan/Notebook/October3

From 2010.igem.org

Miniprep

HokkaidoU Japan 20101003a.JPG

コロニー8, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16からミニプレキットでプラスミドを精製した
->うち1 uLを泳動して確認

  • Insertはおよそ1800 bp, Vectorはおよそ2500 b
  • コントロールの16番以外,それらしいバンドがある
  • 2 ug/uLくらいのDNA量と推定

Insertの確認

HokkaidoU Japan 20101003b.JPG

Miniprepで得たプラスミドをNot Iで処理すれば,約1800 bpのInsertが得られるはずである

well DNA RE
1 λ/Hind III (2 uL) -
2 pSB1T3 (1 uL) -
3 plasmid No.8 Not I
4 EcoR I
5 -
6 plasmid No.10 Not I
7 EcoR I
8 -
9 plasmid No.11 Not I
10 EcoR I
11 -
12 plasmid No.14 Not I
13 EcoR I
14 -
15 plasmid No.16 Not I
16 EcoR I
17 -
  • 制限酵素の切れは悪いが,およそ1800 bpの位置にバンドが見られる
->シークエンスをとって,結果の良さそうなものを翌日,2 piece ligation