Team:HokkaidoU Japan/Notebook/August17

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(→電気泳動)
(→電気泳動)
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|レーン
+
|'''Lane'''
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+
|'''DNA'''
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|1
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 +
=Chloramphenicol LB培地の作製=
=Chloramphenicol LB培地の作製=
組み上げたパーツはpUC1C3につなぐため，クロラムフェニコール入りのLB寒天培地を作った
組み上げたパーツはpUC1C3につなぐため，クロラムフェニコール入りのLB寒天培地を作った

Revision as of 06:27, 20 September 2010

Notebook

ゲル抽出

電気泳動

HokkaidoU Japan 20100817a.JPG

前日に制限酵素処理した20 uLのDNA solutionに4 uLの6x SBを加え，それぞれ2レーンに流した

Lane DNA
1 空き
2 λ/Hind III
3 空き
4 pSB1C3/E, P
5 pSB1C3/E, P
6 Heat Shock Promotor/E, S
7 Heat Shock Promotor/E, S
8 RBS/X, P
9 RBS/X, P
10 RFP/E, S
11 RFP/E, S
12 double Terminator/E, S
13 double Terminator/E, S
14 空き
15 λ/Hind III
16 空き
17 空き

→ゲル抽出

電気泳動

HokkaidoU Japan 20100817b.jpg
  • ゲル抽出して得たDNAを電気泳動で確認した．
  • DNA solution 10 uL に6x SB 2 uL
Lane DNA
1 空き
2 λ/Hind III
3 Vector
4 Heat shock promotor
5 RBS
6 RFP
7 double terminator
8 空き


  • RBSは取れたDNAが少なかったようで，バンドが見られなかった

→翌日Digestionからリベンジ

Chloramphenicol LB培地の作製

組み上げたパーツはpUC1C3につなぐため，クロラムフェニコール入りのLB寒天培地を作った

  • LB-broth 12.5 g, Agar 7.5 gにDWを加えて500 mLにし，オートクレーブにかけた
  • 500 uLのChloramphenicol (34mg/mL) を加えた
  • 25枚のプレートに20 mLずつ分注した
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