Team:HokkaidoU Japan/Notebook/August17
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+ | 前日に制限酵素処理した20 uLのDNA solutionに4 uLの6x SBを加え,それぞれ2レーンに流した | ||
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+ | * ゲル抽出して得たDNAを電気泳動で確認した. | ||
+ | * DNA solution 10 uL に6x SB 2 uL | ||
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+ | * RBSは取れたDNAが少なかったようで,バンドが見られなかった | ||
+ | →翌日Digestionからリベンジ | ||
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+ | =Chloramphenicol LB培地の作製= | ||
+ | 組み上げたパーツはpUC1C3につなぐため,クロラムフェニコール入りのLB寒天培地を作った | ||
+ | * LB-broth 12.5 g, Agar 7.5 gにDWを加えて500 mLにし,オートクレーブにかけた | ||
+ | * 500 uLのChloramphenicol (34mg/mL) を加えた | ||
+ | * 25枚のプレートに20 mLずつ分注した |
Revision as of 11:36, 18 September 2010
ゲル抽出
電気泳動
前日に制限酵素処理した20 uLのDNA solutionに4 uLの6x SBを加え,それぞれ2レーンに流した
レーン | |
1 | 空き |
2 | λ/Hind III |
3 | 空き |
4 | pSB1C3/E, P |
5 | pSB1C3/E, P |
6 | Heat Shock Promotor/E, S |
7 | Heat Shock Promotor/E, S |
8 | RBS/X, P |
9 | RBS/X, P |
10 | RFP/E, S |
11 | RFP/E, S |
12 | double Terminator/E, S |
13 | double Terminator/E, S |
14 | 空き |
15 | λ/Hind III |
16 | 空き |
17 | 空き |
→ゲル抽出
電気泳動
- ゲル抽出して得たDNAを電気泳動で確認した.
- DNA solution 10 uL に6x SB 2 uL
レーン | |
1 | 空き |
2 | λ/Hind III |
3 | Vector |
4 | Heat shock promotor |
5 | RBS |
6 | RFP |
7 | double terminator |
8 | 空き |
- RBSは取れたDNAが少なかったようで,バンドが見られなかった
→翌日Digestionからリベンジ
Chloramphenicol LB培地の作製
組み上げたパーツはpUC1C3につなぐため,クロラムフェニコール入りのLB寒天培地を作った
- LB-broth 12.5 g, Agar 7.5 gにDWを加えて500 mLにし,オートクレーブにかけた
- 500 uLのChloramphenicol (34mg/mL) を加えた
- 25枚のプレートに20 mLずつ分注した