Team:HokkaidoU Japan/Notebook/August12

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=mini prep=
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=Mini prep=
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* LB液体培地で18時間培養した菌を使用した
+
* Used cells incubated for 18h in LB broth
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** 1-18Fは生育が悪かった
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** 1-18F didn't grow well
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* Chloroformのあと遠心し、430 uLの上清をとった
+
* Centrifuge after adding 430 uL of chloroform、collected supernatant
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* 1-18Fは2-プロパノールを入れたあと，遠心しても沈殿がほとんど得られなかった
+
* Added 2-propanol to 1-18F, but after centrifugation there were no precipitation
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* 最後に30 uLのTEに溶かし、電気泳動をした
+
** Melted in 30 uL of TE and did electrophoresis
=電気泳動２=
=電気泳動２=

Revision as of 06:40, 20 September 2010

Notebook

Electrophoresis 1

Electrophoresis of yesterdays ligation of PCR products
  • Checked the result of yesterdays ligation of PCR products by electrophoresis
  • Added 4 uL of 6x Sample Buffer to make 12 uL in total
  • Used 20uL of EtOh

Mini prep

  • Used cells incubated for 18h in LB broth
    • 1-18F didn't grow well
  • Centrifuge after adding 430 uL of chloroform、collected supernatant
  • Added 2-propanol to 1-18F, but after centrifugation there were no precipitation
    • Melted in 30 uL of TE and did electrophoresis

電気泳動２

撮影1回目
撮影2回目

mini prepで得たプラスミドとPCRで得たパーツのDNAを電気泳動で確認した
制限酵素処理はしないので、反応系は以下の通り

１ ２ ３ ４ ５ ６
Parts 1-18F 2-21H 2-11P 2-24G 1-2M 3-1E
DNA solution 2 uL 2 2 1 1 1
6x Sample Buffer 0.4 uL 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4
  • マーカーはλ/HindIIIとpUC119/HinfIを使用
  • レーン１のマーカー（λ/HindIII）はウェルから流れ出てしまった
  • レーン３（mini prepのサンプル，1-18F）はバンドが確認できなかった（後日PCR）
  • レーン４ではplasmidのダイマー，トライマーがよく確認できる（plasmidの電気泳動ではよくあるらしい）
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