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Team:HokkaidoU Japan/Notebook/August12
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* 4 uLの6x Sample Bufferを入れたもののうち、12 uLを流した | * 4 uLの6x Sample Bufferを入れたもののうち、12 uLを流した | ||
* エチジウムブロマイドは20 uL使用した | * エチジウムブロマイドは20 uL使用した | ||
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mini prepで得たプラスミドとPCRで得たパーツのDNAを電気泳動で確認した<br> | mini prepで得たプラスミドとPCRで得たパーツのDNAを電気泳動で確認した<br> | ||
制限酵素処理はしないので、反応系は以下の通り | 制限酵素処理はしないので、反応系は以下の通り | ||
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Revision as of 04:49, 19 September 2010
since 13 Jul 2010
since 1 Aug 2010
電気泳動１
前日のPCR産物のligationの結果を電気泳動で確かめた
- 4 uLの6x Sample Bufferを入れたもののうち、12 uLを流した
- エチジウムブロマイドは20 uL使用した
mini prep
- LB液体培地で18時間培養した菌を使用した
- 1-18Fは生育が悪かった
- Chloroformのあと遠心し、430 uLの上清をとった
- 1-18Fは2-プロパノールを入れたあと，遠心しても沈殿がほとんど得られなかった
- 最後に30 uLのTEに溶かし、電気泳動をした
電気泳動２
mini prepで得たプラスミドとPCRで得たパーツのDNAを電気泳動で確認した
制限酵素処理はしないので、反応系は以下の通り
| １ | ２ | ３ | ４ | ５ | ６ | |
| Parts | 1-18F | 2-21H | 2-11P | 2-24G | 1-2M | 3-1E |
| DNA solution | 2 uL | 2 | 2 | 1 | 1 | 1 |
| 6x Sample Buffer | 0.4 uL | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 |
- マーカーはλ/HindIIIとpUC119/HinfIを使用
- レーン１のマーカー（λ/HindIII）はウェルから流れ出てしまった
- レーン３（mini prepのサンプル，1-18F）はバンドが確認できなかった（後日PCR）
- レーン４ではplasmidのダイマー，トライマーがよく確認できる（plasmidの電気泳動ではよくあるらしい）
