Team:HokkaidoU Japan/Notebook/August12
From 2010.igem.org
Electrophoresis 1
- Checked the result of yesterdays ligation of PCR products by electrophoresis
- Added 4 uL of 6x Sample Buffer to make 12 uL in total
- Used 20uL of EtOh
Mini prep
- Used cells incubated for 18h in LB broth
- 1-18F didn't grow well
- Centrifuge after adding 430 uL of chloroform、collected supernatant
- Added 2-propanol to 1-18F, but after centrifugation there were no precipitation
- Melted in 30 uL of TE and did electrophoresis
電気泳動2
mini prepで得たプラスミドとPCRで得たパーツのDNAを電気泳動で確認した
制限酵素処理はしないので、反応系は以下の通り
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
Parts | 1-18F | 2-21H | 2-11P | 2-24G | 1-2M | 3-1E |
DNA solution | 2 uL | 2 | 2 | 1 | 1 | 1 |
6x Sample Buffer | 0.4 uL | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 |
- マーカーはλ/HindIIIとpUC119/HinfIを使用
- レーン1のマーカー(λ/HindIII)はウェルから流れ出てしまった
- レーン3(mini prepのサンプル,1-18F)はバンドが確認できなかった(後日PCR)
- レーン4ではplasmidのダイマー,トライマーがよく確認できる(plasmidの電気泳動ではよくあるらしい)