Team:HokkaidoU Japan/Notebook/August24
From 2010.igem.org
(Difference between revisions)
Line 1: | Line 1: | ||
- | {{Template:HokkaidoU_Japan}} | + | {{Template:HokkaidoU_Japan}}<div class="linkbar"><div class="prev">[[Team:HokkaidoU_Japan/Notebook/August23|August 23]]</div>[[Team:HokkaidoU_Japan/Notebook|Notebook]]<div class="next">[[Team:HokkaidoU_Japan/Notebook/August25|August 25]]</div></div> |
+ | |||
=ラオリプライマーで増やしたパーツの確認= | =ラオリプライマーで増やしたパーツの確認= | ||
[[Image:HokkaidoU Japan 20100824a.jpg|200px|right|thumb|]] | [[Image:HokkaidoU Japan 20100824a.jpg|200px|right|thumb|]] |
Revision as of 14:55, 18 September 2010
ラオリプライマーで増やしたパーツの確認
- 4つのPCR productsをそれぞれMicrocon YM-10でろ過し,電気泳動にかけた
1 | TSUDA Marker I |
3 | RBS |
4 | GFP |
5 | double terminator |
6 | Promotor |
レーン6のプロモータはバンドが見られなかった
- 配列を確認したところ,ラオリプライマーが対応していないベクターに載っていた.
Ligation Mixtureのチェック
Ligation Mixture「I」とLigation Mixture「M」について
- PCRで増やしてゲル抽したpSB1C3 2 uLにLigation Mixture 4 uLをいれ,それぞれのTransformationした
- LB 200 uLを加え,100 uLずつをChloramphenicol 34 ug/uLと 12 ug/uLの培地にまいた
いろいろ確認
レーン
2 | λ/Hind III |
3 | pSB1C3どうしのLigation |
4 | ラオリプライマーによる1-2NのPCRのろ過産物(上) |
5 | ラオリプライマーによる1-2NのPCRのろ過(下) |
6 | λ/Hind III |
7 | ゲル抽したpSB1C3 |
レーン3でバンドが見られなかった.
- ダイマー,テトラマーなど,さまざまな断片ができ,薄くなってしまった?
レーン7は薄いがバンドが確認できた
- ゲル抽に問題はない